Бордетельоз (Bordetella bronchiseptica) (ПЛР)
Досліджуваний матеріал: епітелій слизової оболонки носової порожнини
Метод визначення: ПЛР у режимі Real time
Бордетели — дрібні плеоморфні грамнегативні кокобацили, що пересуваються завдяки наявності джгутиків. Bordetella bronchiseptica є одним з патогенів, що викликають респіраторні захворювання собак і котів повсюдно (інфекційний трахеобронхіт). До інфекції також чутливі люди та деякі інші тварини, такі як дикі хижаки, свині, гризуни.
Існує багато штамів B. bronchiseptica, які відрізняються вірулентністю та колом господарів. Молекулярне типування показало, що штами, які вражають собак, можуть передаватися котам, і навпаки. За результатами повного секвенування геному B. bronchiseptica було виявлено наявність плазмід, що відповідають за розвиток резистентності до антибіотиків.
Як і вірусні респіраторні інфекції, бордетельоз частіше зустрічається у собак і котів при скупченому утриманні в притулках, зоомагазинах та готелях для тварин. Інфекція B. bronchiseptica часто протікає спільно з респіраторними вірусними інфекціями або інфекцією Mycoplasma spp. Bordetella bronchiseptica може зберігатися у зовнішньому середовищі щонайменше 10 днів, а також розмножуватися у природних водоймах, проте мікроорганізм чутливий до дії більшості дезінфектантів.
Основний шлях передачі інфекції B. bronchiseptica — повітряно-крапельний, проте можлива передача збудника через контаміновані предмети або воду. Мікроорганізм характеризується високою контагіозністю. При вдиханні B. bronchiseptica прикріплюється до війок епітелію дихальних шляхів і секретує токсини, що викликають пошкодження респіраторного епітелію. Капсула захищає бацилу від фагоцитозу та дії системи комплементу. Інфекція B. bronchiseptica супроводжується порушенням функції клітин, підвищеною секрецією слизового секрету, а також порушенням імунного бар'єру, що сприяє розвитку опортуністичних вірусних та бактеріальних інфекцій. Вираженість клінічних симптомів хвороби може варіюватися залежно від штаму збудника, особливостей імунної відповіді господаря, а також наявності супутніх інфекцій. Інкубаційний період становить від двох до десяти днів. Можуть спостерігатися риніт і ринотрахеїт, серозні та слизово-гнійні виділення з носа, чхання, хрипи при диханні та стійкий важкий кашель. У деяких собак розвивається бронхопневмонія, що характеризується лихоманкою, продуктивним кашлем, летаргією та зниженням апетиту.
Виділення B. bronchiseptica інфікованими тваринами відбувається періодично протягом щонайменше одного місяця, іноді – кількох місяців після інфікування. Персистенція інфекції може бути пов’язана зі здатністю мікроорганізму уникати дії факторів імунної системи та виживати у фагоцитах.
Досліджуваний аналіт: епітелій слизової оболонки носової порожнини
Підготовка пацієнта: біоматеріал відбирається до застосування місцевих та системних лікарських препаратів; за наявності гнійного виділень необхідно попередньо видалити його за допомогою чистої марлевої серветки, змоченої 0,9% фізіологічним розчином (NaCl).
Показання: чхання, кашель, виділення з носа, обстеження тварин перед виставками, перед паруванням і перед продажем, обстеження перед вакцинацією Нобівак КС (Nobivac КС) — живою сухою вакциною проти бордетельозу та парагрипу собак.
Протипоказання: невідомі.
Метод відбору біоматеріалу: зішкріб епітеліальних клітин слизової носової порожнини за допомогою урогенітального зонда.
Преаналітика:
- Урогенітальний зонд акуратно ввести на глибину 0.1-0.3 см у носовий прохід та обертальними рухами набрати клітинний матеріал зі слизової оболонки.
- Перенести зонд у мікропробірку 1.5 мл з транспортним середовищем (фіз. розчином 0.5 мл), зонд залишити в пробірці.
- Мікропробірку щільно закрити кришкою до клацання.
- Мікропробірку промаркувати номером направлення.
- Заповнити направлення.
- Температурний режим транспортування до лабораторії +2℃…+8℃
Інтерпретація результату: результати дослідження містять інформацію виключно для лікарів. Діагноз встановлюється на основі комплексної оцінки різних показників, додаткових відомостей та залежить від методів діагностики.
У низці випадків за малої концентрації збудника в зразку можливе отримання хибнонегативних результатів бактеріологічного посіву, у таких ситуаціях ПЛР дозволяє уточнити діагноз. Протягом трьох тижнів після проведення інтраназальної вакцинації можливе отримання позитивних результатів ПЛР.
«Виявлено»: у проаналізованому зразку біологічного матеріалу виявлено фрагмент ДНК, специфічний для комплексу Bordetella bronchiseptica, інфікування B. bronchiseptica.
«Не виявлено»: у проаналізованому зразку біологічного матеріалу не знайдено фрагментів ДНК, специфічних для Bordetella bronchiseptica, або концентрація збудника в зразку нижче межі чутливості методу.
Форма видачі результату: якісний метод. Виявлення або невиявлення у досліджуваному зразку ДНК Bordetella bronchiseptica.
Література:
Ш. Ваден, Д. Нолл, Ф. Сміт, Л. Тіллей. Повний посібник з лабораторних та інструментальних досліджень собак та котів. INFECTIOUS DISEASES OF THE DOG AND CAT, FOURTH EDITION ISBN: 978-1-4160-6130-4 Copyright © 2012, 2006, 1998, 1990 by Saunders, an imprint of Elsevier Inc.